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提高克隆实验的细胞存活率,这个办法好
来源: | 作者:xinrui2018 | 发布时间: 2018-03-30 | 2202 次浏览 | 分享到:

细胞培养指从动物活体体内取出组织,于模拟体内生理环境等特定的体内条件下,进行孵育培养,使之生存并生长。细胞培养旨在获取大量的细胞或其代谢产物,是生物技术中最核心、最基础的技术。细胞培养广泛应用于生物学、医学、新药研发等各个领域,成为最重要的基础科学之一。



细胞的培养需考虑到的外部因素众多,包括温度、pH、渗透压、营养物、无菌条件、光、气体等。细胞株若受到细菌、真菌等生物污染时,较易通过培养基等的外观变化察觉。若受到支原体之污染时,细胞外观多无明显变化、生长速率变化不明显,不宜察觉,但其代谢过程变化会带来DNARNA及蛋白表达发生改变。


由于pH、渗透压、营养物、无菌条件都需要与培养基一起考量,培养基的选择与配置成为细胞培养中至关重要的环节。细胞培养常用的缓冲液、平衡盐溶液包括:PBS缓冲液、无钙镁离子溶液、Hanks液、HEPES液等都需要用到水。这些缓冲液的配置需要大量的水,推荐使用无支原体、无热源的超纯水。


水中常见的污染物有颗粒、离子、有机物、微生物和气体,污染物的存在会培养基的pH、渗透压,从而影响细胞生长速率、干扰细胞的代谢过程。

从图中的数据,可以明显看到水质越好,小鼠细胞克隆数也更高。蒸馏,作为一种传统的水纯化技术,有能耗高、污染物去除水平低的缺陷,随着技术水平的提高也已经逐渐被淘汰。

从上表数据中,可以看出在蒸馏水培养基中牵牛花原生质细胞生存能力仅为16.1%,随着水质的提高,在Milli-Q超纯水培养基中,牵牛花原生质细胞在48小时后的生存百分比达到了85.7%。蒸馏、反渗透技术可以去除部分的污染物,但残留的污染物仍然会明显影响细胞增殖,而Milli-Q超纯水配置Biopak终端过滤器,可更好的去除水中的热源、核酸酶,以满足生物实验的需求。

 

全新的Milli-Q IQ7000综合多种领先的纯化技术,使用专利Jetpore混床离子交换树脂、IQ nano离子交换混合填料、172nm无汞紫外灯,可搭配6种不同的终端过滤器,以满足生物学实验、化学分析、超痕量元素分析等不同需求。


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